說(shuō)到核酸檢測(cè),首先你要了解生物實(shí)驗(yàn)室。根據(jù)危險(xiǎn)度等級(jí)，包括傳染病原的傳染性和危害性，國(guó)際上將生物實(shí)驗(yàn)室分為P1、P2、P3和P4四個(gè)等級(jí)。P1-4實(shí)驗(yàn)室可承擔(dān)的工作也根據(jù)這一安全等級(jí)進(jìn)行劃分，其嚴(yán)格等級(jí)從低到高。P3實(shí)驗(yàn)室又稱防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，適用于處理對(duì)人體、動(dòng)植物或環(huán)境具有高度危害性，通過(guò)直接接觸或氣溶膠使人傳染上嚴(yán)重甚至是致命的疾病，或?qū)?dòng)植物和環(huán)境具有高度危害的致病因子，通常有預(yù)防和治療措施。

    核酸檢測(cè)是極其靈敏且精密的實(shí)驗(yàn)，核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室有特殊的環(huán)境要求，不是隨便開(kāi)辟個(gè)地方就能檢測(cè)的。為什么現(xiàn)在要建立專門的方艙實(shí)驗(yàn)室才能進(jìn)行核酸檢測(cè)，就是這個(gè)道理。

    那么，核酸檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)是如何進(jìn)行的？這個(gè)過(guò)程大致可分為：檢測(cè)前的準(zhǔn)備工作——核對(duì)樣本信息——樣本滅活——開(kāi)蓋加樣和核酸提取——PCR反應(yīng)體系配制——核酸擴(kuò)增檢測(cè)——檢測(cè)完成——高壓滅菌。

    檢測(cè)前

    打開(kāi)樣本前，檢測(cè)人員需穿戴好個(gè)人防護(hù)裝備，如防護(hù)服、口罩、護(hù)目鏡、面屏、雙層醫(yī)用乳膠手套、防水靴套，每個(gè)步驟不能出錯(cuò)。

    檢測(cè)中

    1、核對(duì)樣本信息。

    標(biāo)本都是在嚴(yán)密包裝下被護(hù)送到實(shí)驗(yàn)室的，需要實(shí)驗(yàn)室簽收，錄入信息系統(tǒng)。這個(gè)步驟需要一個(gè)一個(gè)拆包裝，而且是雙層密封包裝，并且每一個(gè)都要消毒處理，做好生物安全防護(hù)。消毒完畢后對(duì)被檢測(cè)樣本的姓名、年齡、性別等信息進(jìn)行核對(duì)。然后將標(biāo)本的信息錄入系統(tǒng)，對(duì)接健康碼。

    這期間，全手工，不比取樣快多少，特別是在海量標(biāo)本里，還要保證0錯(cuò)誤，不能張冠李戴，或者錄信息錄到最后，發(fā)現(xiàn)少了或者對(duì)不上數(shù)，又得再找一遍。

    2、將樣本放在水浴箱中進(jìn)行半個(gè)小時(shí)的56℃的高溫滅活，使病毒蛋白失去生理活性，在不影響病毒蛋白的基因序列的前提下，使病毒失去感染、致病和繁殖能力，保證檢測(cè)過(guò)程的安全性。

    3、實(shí)驗(yàn)員拿到滅活后的樣本時(shí)，第一步是進(jìn)行振蕩，盡量讓拭子上的病毒洗脫在培養(yǎng)基溶液中，第二步是進(jìn)行5分鐘的沉淀。第三部進(jìn)行開(kāi)蓋加樣，這一步必須實(shí)行人工操作，并且需要兩人高度配合完成。一人擰開(kāi)樣本罐的蓋子，另一人拿微量移液器在樣本罐中吸取微量溶液，放到另一個(gè)提取管里，再擰上管蓋。

    核酸提取可以使用儀器輔助，但由于比對(duì)需要，往往要加以人工操作，需要反復(fù)進(jìn)行離心、加試劑、洗滌等10多個(gè)步驟。其中，需要打開(kāi)管蓋的操作就達(dá)7次以上，完成一例人工核酸提取需要50分鐘左右。

    4、走出核心試驗(yàn)區(qū)，開(kāi)始進(jìn)行PCR反應(yīng)體系配制，將提取的病毒核酸加入到核酸擴(kuò)增檢測(cè)試劑中。

    5、將配制好的PCR反應(yīng)物放置在熒光定量PCR儀上。在電腦上設(shè)置PCR反應(yīng)條件，運(yùn)行儀器，開(kāi)始核酸擴(kuò)增檢測(cè)。

    這個(gè)過(guò)程需要1-2個(gè)小時(shí)，而且儀器一旦啟動(dòng)擴(kuò)增程序是不能停下來(lái)中途添加新的標(biāo)本的，必須要等這一批的結(jié)果擴(kuò)增完成后，才能進(jìn)行下一批標(biāo)本的擴(kuò)增。所以，這也是為什么核酸檢測(cè)不能做到隨到隨測(cè)的原因之一。

    檢測(cè)后

    檢測(cè)人員需要實(shí)時(shí)關(guān)注檢測(cè)情況，約1.5小時(shí)后，核酸擴(kuò)增完成，進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果判讀。然后工作人員將結(jié)果上傳信息系統(tǒng)，群眾就可以查詢結(jié)果了。至此，歷經(jīng)大概4小時(shí),整個(gè)流程完成。

    最后，也是非常重要的一步就是對(duì)污染物的高壓滅菌處理。實(shí)驗(yàn)過(guò)程產(chǎn)生的污染物通過(guò)高壓滅菌后，按普通醫(yī)療垃圾處理。

    可以說(shuō)，核酸檢測(cè)的過(guò)程是一個(gè)非常復(fù)雜的過(guò)程，需要實(shí)驗(yàn)人員付出艱苦的勞動(dòng)，同時(shí)還需要保證實(shí)驗(yàn)的安全性、科學(xué)性，這樣才能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。

河南省衛(wèi)生健康委

河南省疾病預(yù)防控制中心